分子生物学 第 5 章 第 8节:其他分子生物学技术
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5.8.1 凝胶滞缓技术
- electrophoretic mobility shift assay,EMSA
- 是体外分析 DNA 与蛋白质相互作用而对一种特殊的凝胶电泳技术
- 基本原理:蛋白质与 DNA 结合后将大大增加相对分子质量,而凝胶电泳中 DNA 朝正电极移动的距离与其相对分子质量的对数成反比,因此,没有结合蛋白质的 DNA 片段迁移得快,而与蛋白质结合形成复合物的 DNA 由于受到阻滞而迁移得快
5.8.2 蛋白质免疫印迹技术
- Western blotting
- 原理:被测蛋白质只能与标记的特异性抗体相结合,而这种结合不改变该蛋白质在凝胶电泳中的相对分子质量
- 应用:能被用于测定抗原的相对丰度或与其他已知抗原的关系
5.8.3 细胞定位及染色技术
- 细胞定位最常用的方法:
- 荧光蛋白标记
- 免疫荧光法