分子生物学 05-8 - 其他分子生物学技术

分子生物学 05-8 - 其他分子生物学技术

这篇文章介绍了分子生物学中的几种技术,包括凝胶滞缓技术(EMSA)、蛋白质免疫印迹技术(Western blotting)和细胞定位及染色技术。其中,EMSA用于分析DNA与蛋白质的相互作用;Western blotting用于测定抗原的相对丰度或其与其他已知抗原的关系;细胞定位技术则通过荧光蛋白标记和免疫荧光法来识别细胞内特定结构或分子。

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分子生物学 第 5 章 第 8节:其他分子生物学技术

5.8.1 凝胶滞缓技术

  • electrophoretic mobility shift assay,EMSA

  • 体外分析 DNA 与蛋白质相互作用而对一种特殊的凝胶电泳技术

  • 基本原理:蛋白质与 DNA 结合后将大大增加相对分子质量,而凝胶电泳中 DNA 朝正电极移动的距离与其相对分子质量的对数成反比,因此,没有结合蛋白质的 DNA 片段迁移得快,而与蛋白质结合形成复合物的 DNA 由于受到阻滞而迁移得快

5.8.2 蛋白质免疫印迹技术

  • Western blotting

  • 原理:被测蛋白质只能与标记的特异性抗体相结合,而这种结合不改变该蛋白质在凝胶电泳中的相对分子质量

  • 应用:能被用于测定抗原的相对丰度或与其他已知抗原的关系

5.8.3 细胞定位及染色技术

  • 细胞定位最常用的方法:

    • 荧光蛋白标记

    • 免疫荧光法

第五章 完

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